Ensayos IN VITRO
La disponibilidad de colecciones grandes de químicos y de numerosas proteínas como destino potencial de la actividad de nuevos herbicidas, requiere el desarrollo de ensayos in vitro que se presten para su miniaturización y HTS. Muchas enzimas con funciones bien definidas pueden ser ensayadas por medio de la medida directa de su producto, o al ligar su actividad a un ensayo colorimétrico o de fluorescencia detectable en un espectrofotómetro. Si se combina este enfoque con HTS usando placas de microtitulación (Figura 3) permite que se seleccionen números masivos de compuestos y sitios potenciales, simultáneamente. Sin embargo, esta estrategia es limitada, si el producto de la enzima es desconocido o difícil de visualizar. La disponibilidad de espectrometría de masas de alto rendimiento ahora permitirá estos ensayos, y posiblemente también aquellos con varias enzimas y/o sustratos, de manera eficiente.
Figura 3. Una placa de microtitulación que contiene plantas de la maleza Lemna minor, las cuales muestran inhibidores de crecimiento (hoyos marcados).
Ensayos para seleccionar herbicidas potenciales que interfieran con interacciones proteína-proteína también se están desarrollando. El sistema levadura híbrido doble, y más recientemente el ensayo de híbrido doble reverso, pueden detectar compuestos que interrumpen las rutas de las señales de transducción u otras funciones celulares que antes eran imposibles de evaluar.